稀釋水的質(zhì)量對BOD5的測定結(jié)果的準確性意義重大，因此要求稀釋水空白5日耗氧必須小于0.2mg/L，最好能控制在0.1mg/L以下，接種稀釋水5日耗氧應(yīng)在0.3~1.0mg/L之間。
保證稀釋水質(zhì)量的關(guān)鍵在于控制其有機物的含量最低和抑制微生物繁殖的物質(zhì)含量最低，因此最好使用蒸餾水作為稀釋水，不宜使用離子交換樹脂制得的純水作為稀釋水，因為去離子水往往含有從樹脂中分離出的有機物。如果制備蒸餾水的自來水中含有某些揮發(fā)性有機物，為預(yù)防其殘留在蒸餾水中，就應(yīng)在蒸餾前進行去除有機物的預(yù)處理。由金屬蒸餾器制得的蒸餾水，應(yīng)注意檢查其中的金屬離子含量，以免發(fā)生抑制微生物的繁殖和代謝，影響B(tài)OD5測定結(jié)果的準確性。
如果所用稀釋水因含有有機物而不符合使用要求時，可采取加入適量曝氣池接種液后，在室溫或20oC條件下貯存一定時間的方法予以消除影響。接種的量以5d耗氧約0.1mg/L為原則，為防止藻類繁殖，貯存必須在暗室中進行。如果貯存后的稀釋水有沉渣，只能取用上清液，可過濾去除沉渣。
為確保稀釋水的溶解氧接近飽和，必要時可用真空泵或水射器吸入經(jīng)凈化的空氣，也可用微型空壓機注入經(jīng)凈化的空氣，還可用氧氣瓶通入純氧，然后將經(jīng)過充氧的稀釋水在20oC培養(yǎng)箱中放置一定時間，使溶解氧達到平衡。冬季在較低室溫放置的稀釋水可能含有過多的溶解氧，夏季高溫季節(jié)則恰好相反，因此在室溫與20oC有明顯差別時，一定要放置在培養(yǎng)箱內(nèi)穩(wěn)定一段時間，使之和培養(yǎng)環(huán)境的氧分壓平衡。
